肉和肉成品中的乳糖的说明要领--Benedict溶液法
今天,找我测小编为大家介绍一下关于肉和肉成品中的乳糖的说明要领--Benedict溶液法
Benedict溶液法
A 试剂
A.a 驯化的酵母混悬液〔麦芽糖存在与否均合用〕
取面包酵母饼2块〔每块17g〕浸泡后用H2O洗涤3次，每次50ml，每次洗涤后均离心。制备含下列因素的作育基：无水MgSO4 1.0g，无水K2HPO4 1.0g，KCl 0.5g，FeSO4·7H2O 0.02g，卵白胨0.7g，家产用麦芽糖20.0g。
将上述各类因素依次用小量H2O消融，逐一插手有H2O 500ml的烧杯中，最后稀释至1L。加热过滤，滤液加热至沸，冷却至室温。将洗过的酵母插手1L作育基中，在30℃作育24h，前几小时要常常搅拌。用倾倒和离心法疏散酵母，用H2O洗涤2次，插手1L奇怪作育基中，再作育24h，前几小时也要搅拌。疏散酵母，用H2O洗涤不少于4次，稀释至100ml并冷藏。酵母可存活2－3周〔冷冻后存活时刻更长〕。
A.b 洗过的酵母混悬液〔麦芽糖不存在时行使〕
取面包酵母饼2块，用约150ml H2O调成匀称的混悬液，离心5min，弃去水层。一再加H2O混归并离心4次，或至水层澄清为止，再将酵母悬浮于H2O中，并用H2O稀释至100ml，在4℃的冰箱中生涯。行使前充拭魅振摇，2周后弃去。
A.c Benedict溶液 取CuSO4·5H2O 16g溶于125－150ml H2O。另取柠檬酸钠的二水合物150g，无水Na2CO3 130g及NaHCO3 10g，溶于约650ml热H2O中。二液归并后冷却，稀释至1L并过滤。
A.d 乳糖尺度溶液
含无水乳糖1.5mg/ml。取乳糖水合物1.5789g加水消融并稀释至1L。
A.e 碘尺度溶液
取I 5.08g及KI 10.2g溶于小量H2O中，过滤，稀释至1L。
A.f 硫代硫酸钠尺度溶液 取Na2S2O3·5H2O 9.92g，加H2O消融并稀释至1L。
A.g 稀醋酸 取HOAc 240ml，加H2O稀释至1L。
A.h 稀磷酸 取H3PO4 240ml，加H2O稀释至1L。
A.I 柠檬酸磷酸盐缓冲液 pH4.8。取0.1M柠檬酸〔19.21g/L〕和0.2M Na2HPO4(28.4g无水/L)，按10.14ml：9.86ml的比例殽杂，在pH计上调pH至4.8，置冰箱中生涯，如产生污浊即弃去。
A.j 淀粉溶液 取可溶性淀粉2.5g和HgI2约10mg，用小量H2O调浆，然后溶于500ml沸H2O中。
B 测定〔有麦芽糖存在〕
取样品10g置100ml糖容量瓶中，加小量H2O，振摇使样品分手。加H2O约50ml，在蒸汽浴上加热约30min，冷却至室温，加HCl 2ml，加H2O至刻度，以脂肪层的底线作为月牙形。
加20%磷钨酸溶液5.0ml，混匀，静置数分钟，用润湿的滤纸过滤。取滤液40ml，置50ml容量瓶中，用氯酚红或其他指示剂调pH至4.8，加pH4.8的缓冲液5ml，稀释至刻度，摇匀。$$取酵母混悬液(a)5ml置离心管中，离心撤除H2O，插手上述样品溶液约40ml，摇匀后在30℃作育3h，并多次搅拌。
离心后取上层清液测定还原糖：上清液10ml置300ml锥形瓶中，加Benedict溶液(c)20ml，在3－5min内加热至沸，并继承沸腾3min，准确计较时刻。取下冷却，渐渐加H2O 100ml和稀HOAc(g)10ml，边加边摇匀。加过量30%的碘尺度液(e)(1.5%乳糖约需15ml)，振摇使Cu2O消融，安排5min以上，加稀H3PO4(h)20ml，用Na2S2O3液(f)滴定过量的I，以淀粉为指示剂。
$$用乳糖尺度溶液10ml测定乳糖与I的比例，照上法至“加Benedict溶液20ml”起举办。$$用H2O 10ml测定碘与硫代硫酸钠的比值，照上法自“加Benedict溶液20ml”起举办。$$ %乳糖＝100KV/W $$ 式中K＝每1ml碘溶液相等的乳糖克数；V＝耗损碘液的体积；W＝中分试样中样品的g数，以100ml作为最初的样品溶液的体积〔105ml减去肉所占的容积〕。 C 测定〔无麦芽糖存在〕取样品10g置100ml糖容量瓶中，加小量H2O，振摇使样品分手。
加H2O约50ml，在蒸汽浴上加热约30min，冷却至室温，加HCl 2ml，加H2O至刻度，以脂肪层的底线作为月牙形。加20%磷钨酸溶液5.0ml，混匀，静置数分钟，用润湿的滤纸过滤。取滤液40ml，置50ml容量瓶中，用氯酚红或其他指示剂调pH至4.8，加pH4.8的缓冲液5ml，稀释至刻度，摇匀。
$$取酵母混悬液(a)5ml置离心管中，离心撤除H2O，插手上述样品溶液约40ml，摇匀后在30℃作育3h，并多次搅拌。
离心后取上层清液测定还原糖：上清液10ml置300ml锥形瓶中，加Benedict溶液(c)20ml，在3－5min内加热至沸，并继承沸腾3min，准确计较时刻。取下冷却，渐渐加H2O 100ml和稀HOAc(g)10ml，边加边摇匀。
加过量30%的碘尺度液(e)(1.5%乳糖约需15ml)，振摇使Cu2O消融，安排5min以上，加稀H3PO4(h)20ml，用Na2S2O3液(f)滴定过量的I，以淀粉为指示剂。$$用乳糖尺度溶液10ml测定乳糖与I的比例，照上法至“加Benedict溶液20ml”起举办。$$用H2O 10ml测定碘与硫代硫酸钠的比值，照上法自“加Benedict溶液20ml”起举办。$$ %乳糖＝100KV/W $$ 式中K＝每1ml碘溶液相等的乳糖克数；V＝耗损碘液的体积；W＝中分试样中样品的g数，以100ml作为最初的样品溶液的体积〔105ml减去肉所占的容积〕。
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