肉中的硝酸盐和亚硝酸盐的说明要领--二甲苯酚法

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二甲苯酚法

A 仪器

回收具有蒸馏球的简朴蒸馏仪器，回收以快速活动的H2O薄模作为冷却剂的玻璃冷凝器。

B 试剂

B.a 间二甲苯酚

2，4-二甲基苯酚。

B.b 银-氨溶液

取无硝酸盐的Ag2SO4 5g溶于60ml NH4OH中，煮沸并浓缩至约30ml，冷却，加H2O稀释至100ml。 B.c 溴甲酚绿指示剂

取溴甲酚绿0.1g溶于0.1N NaOH 1.5ml中，加H2O稀释至100ml。 B.d 硝酸盐尺度溶液 取重结晶的KNO3 0.1805g，加水消融并稀释至1L，或取0.1N HNO3 17.85ml加水稀释至1L。本液10ml中含硝酸氮0.25mg。

C 测定

取毁坏的样品5－10g，加温H2O 80ml充实混匀，打坏全部的团块，在蒸汽浴上加热1h，不时搅拌。移入100ml容量瓶中，冷却，稀释至刻度，摇匀。滤过或静置使沉降，汲取滤液或上清液40ml入50ml容量瓶中〔肉所占的体积不需校正〕。加溴甲酚绿指示剂3滴。滴加H2SO4(1+10)使溶液变黄。在动摇下滴加0.2N KMnO4至微显赤色并一连约1min不退，以氧化亚硝酸盐成硝酸盐。加1ml H2SO4(1+10)和1ml磷钨酸溶液〔20g/100ml〕，稀释至刻度，混匀后滤过。

取不高出20ml，含0.025－0.25mg硝酸盐态氮的样品溶液一份，如体积高出20ml，使呈微碱性并蒸发浓缩，加足量Ag-NH4OH溶液使氯化物所有沉淀，并沉淀大部门过量的磷钨酸(Ag试剂略过量并无防碍，凡是用1－2ml即可〕，沉淀不必撤除，加相等于瓶中液体3倍量的H2SO4(3+1)，加塞，混匀，冷却至约35℃，加间二甲苯酚0.05ml〔1－2滴〕，加塞，振摇，在30－40℃安排30min。

〔硝酸盐使液体呈黄至棕黄色，未除尽的磷钨酸也许发生鲜赤色沉淀，稍过量的磷钨酸不滋扰，但不能太多〕。$$硝化完毕后，加H2O 150ml，留意洗涤瓶塞，蒸馏40－50ml入含5ml NaOH(10g/L)的吸取器中，遏制冷凝水流使冷凝器变温，敏捷移走凝固在冷凝器中的硝基二甲苯酚。将馏液移至100ml容量瓶中，加H2O稀释至刻度。在450nm测定吸光度，并与尺度液曲线较量。

尺度比色液的制备，用硝酸盐尺度溶液10ml，加间二甲苯酚0.05ml，H2SO4(3+1)30ml依次蒸馏并将馏液稀释至500ml。

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