熟牛肉中的五种人工合成色素的测定

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1. 合用范畴 合用于熟牛肉中的五种人工合成色素(柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄 、亮蓝)的测定。

2. 提取 准确称取2±0.2 g 毁坏后的熟牛肉，于50 mL聚丙烯离心管中，插手5 mL丙酮：水（90:10）殽杂溶液，涡动1min，均质1min（1000rpm），4000 rpm离心5 min，转移上清液于50 mL离心管中，残渣用5 mL丙酮：水（90:10）殽杂溶液一再提取两次，归并上清液。上清液中插手10 mL石油醚（60-90℃），上下翻转5次，4000rpm离心3min，撤除石油醚层，基层于80 ℃氮吹至2 mL以下，插手定容至5 mL，混匀，待净化。

3. 净化 预处理赏罚：向Welchrom® P-WAX（60mg/3mL）中插手3 mL甲醇、3 mL水，流出液弃去； 上样：将上述提取液插手柱中，流出液弃去，用5 mL水涮洗样品管，转入SPE柱； 淋洗：3 mL甲醇、3 mL甲醇：甲酸（6：4）依次过柱、3 mL正己烷过柱，小柱真空干燥5 min； 洗脱： 3*1 mL 5%甲醇洗脱，网络； 从头消融：80 ℃氮吹至干，1 mL水复溶，涡动30 s，过0.22μm滤膜，待说明；

4. 检测 色谱前提： 色谱柱： Ultimate® XB-C18 液相色谱柱（4.6 mm x 150 mm, 3 μm）

时刻（min） 活动相A（%） 活动相B（%）

0 92 8

1 92 8

4 80 20

9 10 90

11 10 90

11.1 92 8

17 92 8

活动相： A: 0.02mol/L乙酸铵水溶液（乙酸调理pH=4） B: 甲醇 梯度洗脱措施见右图 流速：0.7 mL/min 进样量： 20 μL 柱温： 40°C 检测波长： 254 nm 运行时刻：17 min

5. 附图

1.柠檬黄；

2.苋菜红；

3.胭脂红；

4. 日落黄 ；

5.亮蓝 要领中行使到的耗材

1、柠檬黄尺度品：WEL-S-0001 苋菜红尺度品：WEL-S-0002 胭脂红尺度品：WEL-S-0003 日落黄尺度品 ：WEL-S-0004 亮蓝尺度品：WEL-S-0005

2、固相萃取小柱：Welchrom® P-WAX（60mg/3mL，P/N：WSP050306）

3、液相色谱柱：Ultimate® XB-C18,4.6 mm x 150 mm, 3 μm（Ult3B18415）

4、13mm，孔径0.22μm尼龙针孔滤膜（P/N: WEL-SFNY213022）

5、12孔固相萃取装置（WEL-Vac-12）

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