特检四项选择免疫学的检测方法

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特检四项(亦称术前四项、输血前四项),是检测包括乙肝表面抗原(HBsAg)、丙肝(HCV)、人类免疫缺陷病毒(HIV)、梅毒(TP),这四种经血液、性行为、母婴垂直传播的传染病的免疫区块的检测技术。

众所周知,随着科技的不断发展,实验室的检测技术出现了日新月异的变化。尤其是免疫检测的这一部分,不仅检测项目愈来愈多,检测的手段也呈现多样化、多层次的局面。而我科目前可采用的检验方法,有胶体金免疫层析技术、颗粒凝胶免疫层析试验(RT)、酶联免疫(ELISA)、免疫颗粒凝集试验(PA)、化学发光免疫(CLIA)。

现在我们就从社会效益及检验结果,亦从所采用的试剂其固需的附属条件来对这三类检测方法进行比较。

一、胶体金免疫层析技术、颗粒凝胶免疫层析试验法(RT)

其优点在于,试验条件要求简单,只需一个试管架,一台离心机、一张可放置物件的桌子,就可以进入试验步骤。

其缺点却有三个方面:

1.因为该试剂质控线性的相对比较窄,所以会出现待检样品因病毒抗体的载量低、或抗体载量过高超过线性范围而出现假阴性(带现像)。也会为着有类同病毒抗体的交叉反应而出现假阳性,还会为着样品的黄疸、脂血而影响试验的结果。

2.虽然该类试剂盒提示在室温内就可操作,但是只要湿度超过60%RH、就会为着湿度的超标而出现假阴性;还会因为室内温度低于 8℃以下而发生一种叫做迟缓反应现象的试验结果,这样就需要适当的延长反应时间才能判读。只是,其中某些样本的试验条带却会出现又因为时间的延迟而出现难以判读甚至是假阳性的结果了。

3.由于该试剂的灵敏度为试验线性所制约,故而它必然就有检测的“窗口期”问题。所谓“检测窗口期”,即大家常听到的,在没有相当保护措施的条件下暴露接触某种病毒后,即使发生了感染,还是必需经过三个月是等待才能检出病毒抗体以判定是否感染。这三个月“检测灰区”或称为“感染隐蔽期”的时间,就是窗口期了。

二、酶联免疫法(ELISA)

其优点,这是一款在免疫学检测序列里堪称金标准的、制备试剂技术已经成熟的定性检测方法。

在试验的过程中其所需的仪器,包括离心机、微型振荡器、洗板机、酶标分析仪、定量刻度移液器。

其缺点是:

1.源于该试剂质控线性下限的额度,容易出现待检样品因病毒抗体的载量低于下限值而出现假阴性的情况。例如乙肝检测的一、四、五阳性(俗称小三阳)的,或一、五阳性的某些检测标本,可能因为病程的迁延而导致HBsAg载量过低者,按酶标仪所给予的数据来判读,就会出现仅报告四、五阳或单五阳的结果,继而导致误判的情形了。

2.该试剂的灵敏度为试验线性所制约,它也有“窗口期”的问题。

3.该试剂的标本加量、洗板均由手工操作,育温时间也是人为选择,故其稳定同一性会受到检测人员的变更,及气温、湿度的变化而出现检测结果有一定线性的飘移情况。

三、化学发光免疫法(CLIA)

这是一种相对新型的全自动免疫定量检测技术(一般称其为四代试剂)。

其优势有个4方面:

1.该检测手段采用全自动化学发光免疫仪操作,全程由电脑控制。由于没有标本加量、单或双次育温选择及反复洗板等复杂的操作,故不会因操作人员的变更而出现线性飘移情况的操作误差。还因为检测过程都在仪器内部完成,所以温度、湿度对检测结果的影响也不会很明显。

2.其试验线性相对较宽,凡在区间内的检测数据都能给予明确的数值标示,这对于临床治疗的观察、转归,有相应的指导意义。

3.对于乙肝病毒表面抗原的检测,其线性范围内最高值达2500.00,最小值为0.03。故只要待检标本内存有大于0.03的病毒表面抗原物质,其就能检测出来并标示明确数值。这就避免了老乙肝患者在运用RT、ELISA方法检测时,只能报告四五项或单五项阳性的尴尬局面,也可更精准地指导临床工作。

4.由于该试剂是采用了病毒抗原、抗体定量联合检测的手段,故能相应的提前解封“窗口期”,它大致能将90天的无助等待期缩短为45天甚至是30天。

这对于有明确传染病接触史,且渴望得到及时确认以便及时进行控制、治疗的人群,无疑是一种福音。


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